大鼠小脑颗粒细胞

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 牌:青志生物
公司名称:?#19981;?#38738;志生物科技有限公司
  地:?#19981;?#21512;肥
发布时间:2019-08-29
浏?#26469;?#25968;:
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产品简介

本公司生产的大鼠小脑颗粒细胞采用胰蛋白酶消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑?#21697;?#31579;选制备而来 细胞总量约为5×105cells/T25/瓶;细胞纯度可达90%以上、而?#20063;?#21547;有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母、和真菌?#21462;? 我们推荐使用青志生物大鼠小脑颗粒细胞专用完全培养基作为体外培养大鼠小脑颗粒细胞的培养基

产品详细信息

细胞简介:大鼠小脑颗粒细胞分离自小脑皮层组织,神经元是神经系统*基本的结构与功能单位,小脑颗粒神经元是体积较小的神经元, ?#26412;?#32422;lOμm , 在中枢神经系统中含量非常丰富,近乎神经元数量的—半。由于小脑神经元的生长、?#21482;?#21644;大脑皮层神经元相似,而且数量多、便于取材,因此小脑颗粒神经元是研?#21487;?#32463;元生长发育神经轴突再生及神经疾病发生机制和临?#37319;?#32463;药理的里要手段。小脑颗粒神经元是小脑主要的中间神经元,在哺乳动物的小脑内数量*为丰富。颗粒神经元的轴突与苔状纤维和爬行纤维相联系,形成小脑皮层内的神经元环路,在小脑的神经活动中起君非常重要的作用。在动物传染性海绵状脑病中,病变可波及小脑颗粒神经元,导致小脑皮层的神经元环?#32933;?#25439;,从而呈现神经性行为失调。研究小脑颗粒神经元在动物传染性海绵状脑病病理学变化中的反应、病理发生的机理特别是分子机理,有利于小脑颗粒神经元细胞模型的建立。小脑颗粒细胞的轴突是沿冠状轴分布的平行纤维,正是这种排列保证了兴奋的单向传导, 这是小脑功能理论中的关键假设,小脑颗粒细胞通过g-氨基丁酸接受戈尔吉细胞的抑制性突触的信息传入。

大鼠小脑颗粒细胞接受后处理

1) 收到非红系有核细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏?#28023;?#35831;拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

大鼠小脑颗粒细胞培养操作

1)复苏细胞?#33322;?#21547;有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解?#24120;?#21152; 入 4mL 培养基混合均 ?#21462;?#22312; 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清?#28023;?#34917; 加 1-2mL 培养基后吹?#21462;?#28982;后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密?#21462;?br /> 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化?#28023;?.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后?#30001;倭颗?#20859;基终止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清?#28023;?#34917;加 1-2mL 培养液后吹?#21462;?br /> 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶?#23567;?br /> 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好?#20445;?#21487;进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存?#20445;?#24323;去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬?#28023;?#27880;意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

大鼠小脑颗粒细胞培养注意事项

1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否?#26032;?#28082;、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞?#24471;?#20070;,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 ?#27426;?#27604;例和客户?#21592;?#30340;培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 技术 部 沟通交流。由于运输?#33041;?#22240;,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。

  ?#19981;?#38738;志生物科技有限公司作为美国ATCC专业代理商,专业经营ATCC菌种、ATCC原代细胞、培养基、抗体、生物试剂、耗材等,青志生物与ATCC共同努力致力于为客户提供可靠的研究材料以及?#22870;?#24555;捷的服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到*?#24080;?#21518;的确保项目准确到位,都有相关专业人士进行维护,确保您在青志生物获得***服务!

  公司网址:http://www.qingbio.com

 

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