大鼠视网膜微血管内皮细胞

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产品型号:
 牌:青志生物
公司名称:?#19981;?#38738;志生物科技有限公司
  地:?#19981;?#21512;肥
发布时间:2019-08-29
浏?#26469;?#25968;:
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产品简介

 本公司生产的大鼠视网膜微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法结合密度梯度离心法、*后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,  细胞总量约为5×105cells/T25/瓶;细胞纯度可达90%以上、而?#20063;?#21547;有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母、和真菌?#21462;?

产品详细信息

细胞简介:
大鼠视网膜微血管内皮细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层
和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络腰紧密相连,由色素上皮细胞
组成,它们昙有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修要等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分
别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤
维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的—层薄膜,有感光作用,后部鼻侧有—视神经**。视网膜上的感觉层
是由三个神经元组成。第—神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视
网膜上,而视锥细胞则在中心?#21363;?多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与—个神经节细胞相
联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是—层菲薄的但?#22336;?#24120;要杂的结构,它贴于眼球的后壁
部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄
斑区,其分辨能力*强。它是组成血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物?#35782;?#32500;持血管张力、调
节血压、抗血栓形成等?#22411;?#35201;作用,在视网膜血管疾病的发病机制中有玺要病理生理学意义。由于从不同的组织和器官
获4导的内皮细胞昙有不同的特性,在脑和视网膜中,这些内皮细胞昙有内屏障的功能,在调节血管生理状态,释放血管
活性物质以及新生血管的形成中发挥君歪要作用,体外分离培养RCEC对研究视网膜血管性疾病发生发展的病理生理机制
以及疾病的早期防治具有重要临床意义。


 培养基信息

  我们推荐使用青志生物大鼠视网膜微血管内皮细胞专用完全培养基作为体外培养大鼠视网膜微血管内皮细胞的培养基


大鼠视网膜微血管内皮细胞接受后处理

1) 收到非红系有核细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

大鼠视网膜微血管内皮细胞培养操作

1)复苏细胞?#33322;?#21547;有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中?#26438;?#25671;晃解?#24120;?#21152; 入 4mL 培养基混合均 ?#21462;?#22312; 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹?#21462;?#28982;后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密?#21462;?br /> 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,?#26438;?#25343;回操作台,轻敲几下培养 瓶后?#30001;?#37327;培养基终止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹?#21462;?br /> 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好?#20445;?#21487;进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存?#20445;?#24323;去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO ?#24352;?#24230;为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

大鼠视网膜微血管内皮细胞培养注意事项

1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否?#26032;?#28082;、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞?#24471;?#20070;,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 ?#27426;?#27604;例和客户?#21592;?#30340;培养基混合,使细胞逐渐?#35270;?#22521;养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。

  ?#19981;?#38738;志生物科技有限公司作为美国ATCC专业代理商,专业经营ATCC菌种、ATCC原代细胞、培养基、抗体、生物试剂、耗材等,青志生物与ATCC共同努力致力于为客户提供可靠的研究材料以及?#22870;?#24555;捷的服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到*?#24080;?#21518;的确保项目准确到位,都有相关专业人士进行维护,确保您在青志生物获得***服务!

  公司网址:http://www.qingbio.com

 

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