大鼠視網膜微血管內皮細胞

產品價格: < 面議
產品型號:
 牌:青志生物
公司名稱:安徽青志生物科技有限公司
  地:安徽合肥
發布時間:2019-08-29
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產品簡介

 本公司生產的大鼠視網膜微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯合消化法結合密度梯度離心法、*后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,  細胞總量約為5×105cells/T25/瓶;細胞純度可達90%以上、而且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母、和真菌等。

產品詳細信息

細胞簡介:
大鼠視網膜微血管內皮細胞分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層
和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡腰緊密相連,由色素上皮細胞
組成,它們曇有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修要等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分
別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖
維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的—層薄膜,有感光作用,后部鼻側有—視神經**。視網膜上的感覺層
是由三個神經元組成。第—神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視
網膜上,而視錐細胞則在中心凹處*多。第二層叫雙節細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與—個神經節細胞相
聯系,負責聯絡作用。第三層叫節細胞層,專管傳導。視網膜是—層菲薄的但又非常要雜的結構,它貼于眼球的后壁
部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃
斑區,其分辨能力*強。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調
節血壓、抗血栓形成等有歪要作用,在視網膜血管疾病的發病機制中有璽要病理生理學意義。由于從不同的組織和器官
獲4導的內皮細胞曇有不同的特性,在腦和視網膜中,這些內皮細胞曇有內屏障的功能,在調節血管生理狀態,釋放血管
活性物質以及新生血管的形成中發揮君歪要作用,體外分離培養RCEC對研究視網膜血管性疾病發生發展的病理生理機制
以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。


 培養基信息

  我們推薦使用青志生物大鼠視網膜微血管內皮細胞專用完全培養基作為體外培養大鼠視網膜微血管內皮細胞的培養基


大鼠視網膜微血管內皮細胞接受后處理

1) 收到非紅系有核細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養基,添加 6ml本公司附帶的完全培養基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。

大鼠視網膜微血管內皮細胞培養操作

1)復蘇細胞:將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。 
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

大鼠視網膜微血管內皮細胞培養注意事項

1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養,待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。

  安徽青志生物科技有限公司作為美國ATCC專業代理商,專業經營ATCC菌種、ATCC原代細胞、培養基、抗體、生物試劑、耗材等,青志生物與ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務,對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準確到位,都有相關專業人士進行維護,確保您在青志生物獲得***服務!

  公司網址:http://www.qingbio.com

 

大鼠視網膜微血管內皮細胞說明書pdf版和相關資料下載


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